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從胰腺細(xì)胞中提取RNA具有一定的挑戰(zhàn)性，在這里，美國俄亥俄州立大學(xué)的科學(xué)家Robert Szulawski等提出一種可重復(fù)的方法，該方法可以從嚙齒動(dòng)物幼體胰腺細(xì)胞中獲得充足的、高質(zhì)量的RNA，用于體外表達(dá)研究。組織取自TLR3+/+和TLR3-/-的雌性非肥胖型糖尿病老鼠，該老鼠處于糖尿病前期階段。組織經(jīng)液氮冷凍后切片，將組織切片固定在高濃度的酒精溶液中，并用含酒精的甲酚紫溶液染色，再水化作用使得固定切片zui小化。激光顯微切割系統(tǒng)Leica LMD6000 能夠從外形上識(shí)別胰腺細(xì)胞，并從組織中捕獲高濃度的胰腺RNA樣品。用胰腺cDNA進(jìn)行探針法實(shí)時(shí)定量PCR檢測CXC趨化因子配體10，該配體是一種炎癥標(biāo)記物可用于鑒定1型糖尿病。這一方法可作為顯微切割技術(shù)用于嚙齒動(dòng)物胰腺細(xì)胞的典型代表，采用此方法只需要少量的組織便可進(jìn)行表達(dá)研究，且不需要進(jìn)行RNA的預(yù)擴(kuò)增。利用非肥胖型糖尿病老鼠作為動(dòng)物模型對于1型糖尿病的研究具有直接意義。
原文：
Robert Szulawski，Masato Nakazawa，Kelly D. McCall，Calvin B.L. James，and Frank L. Schwartz，Laser capture microdissection tailored to type 1 diabetes mellitus research，BioTechniques60: 293-298 (August 2016)
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